3730xl 基因分析仪的操作实录维护保养手册

一、仪器概述与核心作用  

3730xl 基因分析仪采用双光束双侧激光激发、光栅分光装置和后置超薄CCD检测成像系统，配合POP-7液体分离胶和动态内镀毛细管壁技术，在提高数据质量的同时最大限度降低试剂消耗。其核心作用涵盖以下领域：  

DNA测序：菌液、质粒、PCR产物测序，Fosmid/Cosmid/BAC双末端测序，大片段法测序，EST测序和分析，步移测序等。  

片段分析：微卫星DNA（STR）分型、AFLP分析、LOH分析、SSCP分析等。  

SNP分析：单核苷酸多态性筛选与验证，重测序应用。  

基因突变检测：微生物与病毒的分型与鉴定。  

定量分析：基因片段大小分析和定量分析。  

在技术参数方面，3730XL一次电泳可测定96个样品，一天可运行多达12次测序电泳，日测序产率可达1152个样品。精确读长可达800～1000bp，单碱基准确率高达99.99%，片段分析分辨率精确到0.05bp。  
 

二、3730xl 基因分析仪标准使用流程  

开机与初始化  

3730XL系统由仪器和计算机两部分组成，必须按正确顺序启动，否则可能导致通信故障、运行中断甚至数据丢失。正确的开机顺序为：  

先开启计算机，以本地管理员（Administrator或INSTR-ADMIN）身份登录。  

再按下仪器电源按钮，等待绿色指示灯亮起。  

启动DataCollectionSoftware（数据采集软件），等待所有4项服务均显示为绿色。  

样品准备与上机  

样品准备是保证数据质量的关键环节。以微卫星基因分型为例，典型流程包括：DNA提取→PCR扩增→产物稀释→与Hi-Di甲酰胺及内标（如LIZ500）混合→离心→上机分析。  

上机时需注意：  

将样品板放入自动进样器堆叠机，仪器内置条形码阅读器可自动识别样品信息。  

仪器可容纳16块96孔或384孔样品板连续运行，实现全自动进样。  

根据实验需求选择合适的运行模块（短片段测序、快速测序、标准测序或长片段测序）。  

数据采集与分析  

3730XL配套完整的软件套件：  

DataCollectionSoftware：管理仪器设置，控制运行，实时数据可视化。  

SequencingAnalysisSoftware：自动碱基识别、质量值分配、数据修剪与编辑。  

GeneMapper：可配置的自动等位基因检出，适用于高通量基因分型。  

SeqScape：重测序应用分析。  

运行结束后，软件自动完成碱基判读和质量评分（QV），用户可进一步在GeneMapper中进行基因型分析、等位基因判定和结果导出。  

三、维护保养体系  

3730xl 基因分析仪的维护任务按频率分为日常、周度、月度和按需维护四个层级。  

日常维护  

检查阳极和阴极缓冲液液位，确保在填充线以上，防止毛细管或阵列干燥。  

检查废液容器是否需要清空。  

运行结束后执行常规清洗程序。  

周度维护  

建议每周重启一次系统，以清除潜在的通信问题或软件缓存异常。  

检查POP-7聚合物状态。聚合物在仪器上可保持稳定约7天，超过7天需执行WaterWashWizard并更换新鲜聚合物。切勿将新鲜聚合物添加到旧聚合物中（"topoff"），以免影响数据质量。  

缓冲液有效期约48小时，每次新运行前需更换新鲜配制的1XRunningBuffer。  

月度及按需维护  

检查毛细管阵列状态。阵列的保修期为一定运行次数或收货后一年（以先到者为准）。当出现读长缩短、四色拖尾峰等数据质量下降迹象时，应及时更换。  

检查注射器、聚合物输送系统的工作状态。  

检查硬盘D、E、F盘可用空间，及时清理过期数据记录。  

关机管理  

短期关机（闲置不超过一周）：执行短期关机向导即可。  

长期关机（闲置超过一周）：使用InstrumentShutdownWizard执行长期关机程序。  

关机顺序：先在ServiceConsole中点击"StopAll"，等待4项服务变绿后关闭软件，再关闭计算机，最后关闭仪器电源。  

四、注意事项  

操作规范  

严格遵循开机/关机顺序：不正确的启动顺序可能导致通信中断和数据丢失。  

使用指定试剂：不建议混用不同型号的仪器试剂，各试剂按不同工艺制造，混用可能损害系统完整性。  

试剂有效期管理：过期试剂可能影响数据完整性，厂商仅对未过期试剂提供性能保证。  

信号强度控制：3730XL原始数据的最大信号阈值为32,000rfu，出现平顶的峰（offscale）时需减少模板量或缩短注射时间。  

样品处理  

样品需避光保存，防止荧光染料降解。  

在Hi-Di甲酰胺中浸泡超过6小时的样品板应热封保存（3730XL可自动穿刺热封板）。  

模板DNA的质量和浓度直接影响测序质量，建议使用新鲜制备的DNA，并参照推荐用量。  

环境与软件  

仪器使用标准110V或220V电源，简化安装和实验室桌面部署。  

仪器计算机可连接局域网，但需注意：因网络连接导致的系统问题（如病毒、攻击、系统更新等）不在保修范围内。  

数据采集软件许可证需每年续期，续期免费但需联网操作。  

温控炉范围为18～70℃，较高的电泳温度有助于去除DNA二级结构的影响。